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游離核酸樣本保存管

產(chǎn)品特點(diǎn)：

產(chǎn)品編號(hào)：ST2001；ST2002

產(chǎn)品概述
技術(shù)參數(shù)
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游離DNA樣本保存管

英文名稱： Cell-Free DNA Storage Tube

采血量： 9.75ml 添加劑：專有保護(hù)劑

材質(zhì)：硅化玻璃儲(chǔ)存：室溫保存1年

保存時(shí)間：4-37°C下穩(wěn)定保存cf-DNA大于 14天

產(chǎn)品簡(jiǎn)介及原理

游離核酸作為新型的醫(yī)療診斷標(biāo)志物，與腫瘤學(xué)、產(chǎn)前遺傳學(xué)診斷的發(fā)展有著非常密切的聯(lián)系，研究發(fā)現(xiàn)，健康血漿樣本中只有極少量的cfDNA（約5-30ng/ml），外周血cfDNA水平的增加與許多臨床疾病發(fā)生有關(guān)。在遺傳診斷領(lǐng)域，通過(guò)采集孕婦外周血，并提取血液中游離脫氧核糖核酸（cfDNA）并進(jìn)一步分離出游離的胎兒脫氧核糖核酸（cffDNA），結(jié)合下一代測(cè)序技術(shù)（NGS），結(jié)合相關(guān)生物信息分析，對(duì)胎兒的遺傳信息進(jìn)行分析達(dá)到無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷的目的。常規(guī)條件下，通常采用含有抗凝劑的新鮮血液采集、儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，血液中有核細(xì)胞容易破碎并釋放出細(xì)胞基因組DNA及其他成分，導(dǎo)致血漿中游離DNA成分受到污染，或者受到核酸酶介導(dǎo)的降解等影響。

百泰克游離核酸（cf-DNA）保存管中特有的保護(hù)劑，能夠有效穩(wěn)定血液中具核血細(xì)胞，抑制核酸酶介導(dǎo)的降解，維持cf-DNA的穩(wěn)定，避免體細(xì)胞基因組的污染。

產(chǎn)品作用：

用于收集、運(yùn)輸和儲(chǔ)存血液樣本，有效穩(wěn)定血液中具核血細(xì)胞，抑制核酸酶介導(dǎo)的降解，維持cf-DNA的穩(wěn)定，避免體細(xì)胞基因組的污染。

產(chǎn)品應(yīng)用：NIPT無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)：孕婦外周血的胎兒游離DNA保存

腫瘤液體活檢：循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）和ctDNA（循環(huán)腫瘤DNA）保存

其他：血漿基因組DNA和游離DNA保存

保存管核酸保存性能：

樣本類型	游離DNA	胞內(nèi)基因組DNA
樣本保存時(shí)間	14天	14天
樣本保存溫度	4-37℃	4-37℃

產(chǎn)品特點(diǎn)：

保存時(shí)間長(zhǎng) ：樣本穩(wěn)定保存時(shí)間大于14天。

穩(wěn)定性好：樣本管，保存樣本后，可適應(yīng)嚴(yán)苛的高溫、震動(dòng)運(yùn)輸條件。

相關(guān)研究數(shù)據(jù)：

圖 1不同保存天數(shù)下血液保存現(xiàn)象

備注：E0、E3、E7、E14：EDTA二鈉 0d、3d、7d、14d離心上清; S0、S3、S7、S14：S公司保存管 0d、3d、7d、14d離心上清; P0、P3、P7、P14：Bioteke 0d、3d、7d、14d離心上清。
圖1 顯示：保存第7天和第14天，E組出現(xiàn)明顯的溶血現(xiàn)象，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)更加嚴(yán)重；S品牌產(chǎn)品保存的血液第7天略微有溶血現(xiàn)象，第14天時(shí)，溶血嚴(yán)重。相比之下，B品牌產(chǎn)品效果較佳。

圖 2 Qubit 檢測(cè)不同保存天數(shù)下每毫升血液cf-DNA濃度（ng/ml）

圖2 顯示：25°C條件下，E產(chǎn)品在第0天時(shí)，基因組基本無(wú)釋放；第3、7、14天的核酸量隨時(shí)間延長(zhǎng)，基因組釋放量增加明顯；第14天的核酸檢測(cè)量是第0天的至少2500倍。 B產(chǎn)品的保存效果在14天之內(nèi)，基本能夠抑制基因組的釋放；第14天的檢測(cè)結(jié)果為第0天的1.77倍。S品牌產(chǎn)品7天之內(nèi)，能夠保持cfDNA穩(wěn)定，基本無(wú)基因組釋放；但第14天檢測(cè)量劇增，是第0天的2200倍。

圖3 不同保存天數(shù)下每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)

圖3 顯示：Beta-actin絕對(duì)定量結(jié)果趨勢(shì)與Qubit結(jié)果基本一致，室溫25°C保存3天，3種保存管的差異不顯著；保存第7天時(shí)，E與B組間的P Value<0.01，差異極顯著，B與S組 0.01

，差異具有顯著性；保存第14天時(shí)，B與S組P value<0.01，差異極顯著。

圖4 不同保存天數(shù)下每毫升血液cf-DNA濃度（ng/ml）

圖4Qubit結(jié)果顯示：三種保存管7天內(nèi)保存效果無(wú)明顯差異，14天時(shí)，K組與S組保存管均出現(xiàn)明顯的上升，分別是第0天的15.27倍和10.21倍，21天時(shí)，上升最為明顯，分別是第0天的22.46倍和13.84倍。B組保護(hù)劑保存的血液在第0、3、7、14、21、28天檢測(cè)時(shí)，每毫升血液cf-DNA濃度均無(wú)明顯的上升。

圖5 不同保存天數(shù)下每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)

圖5Beta-actin絕對(duì)定量結(jié)果與圖4基本一致。B2組保護(hù)劑保存的血液在第0、3、7、14、21、28天檢測(cè)時(shí)，每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)均無(wú)明顯的上升。

不同天數(shù)下（4°C）游離核酸保存效果的對(duì)比

圖6 不同保存天數(shù)下每毫升血液cf-DNA濃度（ng/ml）

圖6Qubit結(jié)果顯示：在4°C情況下，三種保存管0-14天的每毫升血液cf-DNA濃度并無(wú)明顯的差異。

圖7 不同保存天數(shù)下每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)

圖7Beta-actin結(jié)果顯示：在4°C情況下，三種保存管0-14天的每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)并無(wú)明顯的差異。

不同天數(shù)下（37°C）游離核酸保存效果的對(duì)比

圖8 不同保存天數(shù)下每毫升血液cf-DNA濃度（ng/ml）

圖8Qubit結(jié)果顯示：在37°C情況下，三種保存管0-14天的每毫升血液cf-DNA濃度并無(wú)明顯的差異。

圖9 不同保存天數(shù)下每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)

圖9Beta-actin結(jié)果顯示：在37°C情況下，三種保存管0-14天的每毫升血液Beta-actin拷貝數(shù)并無(wú)明顯的差異。

運(yùn)輸環(huán)境（25°C）對(duì)游離核酸保存效果的影響

考慮到保存管有可能應(yīng)用于樣品的長(zhǎng)途或短途運(yùn)輸，因此需用搖床模擬運(yùn)輸環(huán)境對(duì)保護(hù)劑抑制細(xì)胞破裂的影響。S組、K組及B組分別采集血液一份，搖床設(shè)置180rpm，25°C，分別在0、3、7、14天檢測(cè)核酸濃度和beta-actin拷貝量。